ความแตกต่างระหว่าง ELISA แบบตรงและแบบทางอ้อม Direct vs Indirect ELISA
ความแตกต่างที่สำคัญ - การตรวจทางตรงและทางอ้อม ELISA
การตรวจด้วยภูมิคุ้มกันของเอนไซม์ในหลอดเลือดแดง (ELISA) ซึ่งเป็นที่รู้จักกันว่าเอนไซม์ immunoassay คือการตรวจทางซีรั่มที่ตรวจหาแอนติบอดีในเลือด ใช้เป็นเครื่องมือในการวินิจฉัยเพื่อตรวจสอบว่าผู้ป่วยได้รับเชื้อไวรัสชนิดใดชนิดหนึ่งหรือมีเชื้ออื่น ๆ (แอนติเจน) หรือไม่และร่างกายมีภูมิคุ้มกันต่อการติดเชื้อหรือไม่ ELISA สามารถระบุการติดเชื้อในอดีตและในปัจจุบัน ดังนั้นจึงมักใช้ ELISA เป็นแบบทดสอบ prescreening โดยแพทย์ก่อนที่จะมีการวิเคราะห์เชิงลึกของโรค การทดสอบนี้สามารถทำได้ในห้องปฏิบัติการโดยการเก็บตัวอย่างเลือดจากผู้ป่วย มีการทดสอบ ELISA สองแบบคือ ELISA แบบตรงและ ELISA โดยทางอ้อม ความแตกต่างที่สำคัญระหว่าง ELISA ทั้งทางตรงและทางอ้อมคือ ELISA โดยทางอ้อมน้อยกว่า มีความอ่อนไหวมากขึ้นและต้องใช้แอนติบอดีรองในขณะที่ ELISA มีความไวน้อยกว่าและใช้เพียงแอนติบอดีหลัก .
เนื้อหา1 ภาพรวมและข้อแตกต่างที่สำคัญ
2. Direct ELISA คืออะไร
3. Indirect ELISA คืออะไร
4. การเปรียบเทียบแบบเคียงข้างกัน - Direct vs Indirect ELISA
5. สรุป
ELISA ตรงคืออะไร?
ELISA เป็นการตรวจวินิจฉัยโรคเพื่อตรวจหาแอนติเจนหรือแอนติเจนในเลือด มันทำเหมือนแผ่นทดสอบ จะใช้แอนติบอดีที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์ที่ตรวจสอบได้ง่าย การปรากฏตัวของแอนติเจนในตัวซีรั่มจะผูกกับแอนติบอดีจำเพาะที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์ ในขั้นตอนสุดท้ายจะมีการเพิ่มสารตั้งต้นเพื่อทำปฏิกิริยากับเอนไซม์ เอนไซม์จะแปลงพื้นผิวเป็นสีหรือผลิตผลสัญญาณ การเปลี่ยนสีในสารเคมีพบว่ามีแอนติบอดีจำเพาะในซีรั่มตัวอย่าง การทดสอบ ELISA โดยตรงใช้แอนติบอดีหลักที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์เท่านั้น เมื่อเชื่อมต่อกับแอนติเจนจะเปลี่ยนสีได้อย่างรวดเร็วโดยแสดงให้เห็นว่ามีเชื้อติดเชื้ออยู่ในเลือด อย่างไรก็ตามความเข้มของสัญญาณลดลงใน ELISA โดยตรงเนื่องจาก epitope ถูก จำกัด ให้มีผลผูกพันกับแอนติเจน ดังนั้น ELISA แบบตรงมีความไวน้อยกว่า ELISA โดยทางอ้อม
ELISA ทางอ้อมคืออะไร?
ELISA สามารถทำได้โดยใช้แอนติบอดี 2 ชนิดคือ แอนติบอดีหลักและแอนติบอดีทุติยภูมิ เครื่องมือทางอ้อม ELISA ใช้แอนติบอดีทั้งสองชนิดเพื่อขยายสัญญาณเพื่อการตรวจจับที่ดีขึ้น เทคนิค ELISA ทางอ้อมดำเนินการดังนี้
- แอนติบอดีแรกถูกเพิ่มและล้าง
- แอนติบอดีต่อเอนไซม์ที่มีเอนไซม์เพิ่มและล้าง
- เพิ่มพื้นผิวและสามารถทำปฏิกิริยากับเอนไซม์ได้
- ตรวจพบสัญญาณและมีการระบุหรือไม่มีแอนติเจนเฉพาะในตัวอย่าง
- ในการทดสอบ ELISA โดยทางอ้อม, แอนติบอดีรองหลายตัวสามารถผูกกับแอนติบอดีตัวแรก แอนติบอดีรองมีการเชื่อมโยงกับเอนไซม์ที่ตรวจสอบได้ง่าย ดังนั้นการผูกคำหนึ่งอาจทำให้สัญญาณแรงเนื่องจากมีปฏิสัมพันธ์มากกว่าหนึ่งครั้ง ดังนั้น ELISA ทางอ้อมจึงมีความไวมากกว่า ELISA โดยตรง อย่างไรก็ตาม ELISA ทางอ้อมสามารถสร้างสัญญาณที่ไม่เฉพาะเจาะจงได้เนื่องจากปฏิกิริยาข้ามระหว่างแอนติบอดีที่สอง
รูปที่ 02: การทดสอบ ELISA ทางอ้อม
ELISA แบบตรงและทางอ้อมมีความแตกต่างกันอย่างไร?
- diff บทความ Middle ก่อน Table ->
Direct vs Indirect ELISA
Direct ELISA มีความไวน้อยกว่า ELISA โดยทางอ้อม |
|
| ELISA ทางอ้อมอ่อนไหวมากขึ้น | เวลาที่ได้รับ |
| การทดสอบ ELISA โดยตรงเป็นกระบวนการที่รวดเร็ว | |
| ELISA ทางอ้อมเป็นเวลานาน | การใช้แอนติบอดี |
| ใช้แอนติบอดีชนิดหนึ่ง (แอนติบอดีขั้นต้น) ใน ELISA โดยตรง | |
| แอนติบอดีปฐมภูมิและทุติยภูมิจะใช้สำหรับ ELISA ทางอ้อม | การเชื่อมโยงกับเอนไซม์ |
| แอนติบอดีหลักมีการเชื่อมโยงกับเอนไซม์ | |
| แอนติบอดีรองจะเชื่อมโยงกับเอนไซม์ | ปฏิกิริยาข้ามของแอนติบอดีที่สอง |
| Direct ELISA ช่วยลดความสามารถในการทำปฏิกิริยาข้ามของแอนติบอดีที่สอง | |
| ELISA ทางอ้อมมีผลต่อปฏิกิริยาข้ามของแอนติบอดีที่สอง | สัญญาณ |
| สัญญาณแย่กว่า ELISA โดยอ้อม | |
| สัญญาณถูกขยายโดยใช้วิธี ELISA ทางอ้อม ดังนั้นจึงง่ายต่อการตรวจจับ | บทคัดย่อ - ELISA เป็นเทคนิคทางชีวเคมีที่ใช้ในภูมิคุ้มกันเพื่อตรวจหาแอนติบอดีหรือแอนติเจนในตัวอย่างเลือดของผู้ป่วย สามารถดำเนินการผ่านกระบวนการสองแบบที่เรียกว่า ELISA โดยตรงหรือโดยอ้อม การทดสอบ ELISA โดยตรงใช้แอนติบอดีหลักเพียงอย่างเดียวในการตรวจหาแอนติเจนในขณะที่ ELISA ทางอ้อมใช้ทั้งแอนติบอดีหลักและ secondary ในแอนติบอดีย์โดยตรงแอนติบอดีหลักจะถูกระบุว่าในแอนติบอดีรองระดับเอลิซ่าโดยทางอ้อมจะมีข้อความว่า นี่คือความแตกต่างระหว่าง ELISA ทั้งทางตรงและทางอ้อม |
อ้างอิง
1 "การตรวจด้วยภูมิคุ้มกันที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์ (ELISA) "แถลงการณ์ขององค์การอนามัยโลก U. S. หอสมุดแห่งชาติแพทยศาสตร์, 1976. Web 29 มี.ค. 2017
2. Loon, A. M รถตู้, J. T Van Der Logt, F. W. Heessen และ J. Van Der Veen การทดสอบ immunosorbent ด้วยเอนไซม์ที่ใช้แอนติเจนที่ติดฉลากเพื่อตรวจหาแอนติบอดีต่อ immunoglobulin M และ A ใน toxoplasmosis: เปรียบเทียบกับ immunofluorescence ทางอ้อมและการทดสอบ immunosorbent แบบ double-sandwich enzyme-linked วารสารจุลชีววิทยาทางคลินิก U. S. หอสมุดแห่งชาติแพทยศาสตร์, มิถุนายน 1983 เว็บ 29 มี.ค. 2017
ภาพมารยphép:
1. "แผนภาพ ELISA" โดย Cavitri - งานของตัวเอง (CC BY 3.0) via Commons Wikimedia
2. "Indirect ELISA" โดย Cawang - งานของตัวเอง (CC0) ผ่านวิกิมีเดีย
