ความแตกต่างระหว่าง Gel Electrophoresis และ SDS Page | Gel Electrophoresis vs SDS Page

Anonim

ความแตกต่างที่สำคัญ - เจล Electrophoresis vs SDS Page

เจลอิเลคโตรโฟเรซิสเป็นเทคนิคที่แยกโมเลกุลออกจากโมเลกุลในสนามไฟฟ้า เป็นวิธีการทั่วไปในชีววิทยาโมเลกุลเพื่อแยกดีเอ็นเออาร์เอ็นเอและโปรตีนออกจากสารผสมตามขนาดโมเลกุลของมัน หน้า SDS เป็นชนิดของเจลอิเล็กโทรเฟอร์เรซินที่ใช้ในการแยกโปรตีนออกจากส่วนผสมของโปรตีนตามขนาด เจลอิเล็กโตรโฟเรโซซิสเป็นคำศัพท์ที่ใช้เพื่ออ้างถึงเทคนิคปกติที่ใช้สำหรับ DNA, RNA และการแยกโปรตีน ในขณะที่ SDS Page คืออิเลคโตรโฟเรซิสเจลชนิดหนึ่ง นี่คือข้อแตกต่างที่สำคัญระหว่าง gel electrophoresis กับ SDS Page

เนื้อหา

1 ภาพรวมและข้อแตกต่างที่สำคัญ

2. Gel Electrophoresis คืออะไร

3. SDS Page คืออะไร

4. การเปรียบเทียบแบบ Side by Side - เจล Electrophoresis เทียบกับ SDS Page

5. สรุป

Gel Electrophoresis คืออะไร?

เจลไฟฟ้าเป็นเทคนิคทั่วไปที่ใช้ในห้องทดลองเพื่อแยกโมเลกุลที่มีประจุเช่น DNA, RNA, โปรตีน ฯลฯ จากส่วนผสมของพวกเขา เจลถูกใช้ในการเจลอิเล็กโตรโฟเรซิส มันทำหน้าที่เป็นตะแกรงโมเลกุล มีเจลสองชนิดที่ใช้ในการเจลอิเล็กโตรโฟเรซิสคือ agarose และ polyacrylamide การเลือกการเตรียมเจลและเจลเป็นปัจจัยสำคัญที่ต้องพิจารณาในเจล electrophoreses เนื่องจากขนาดรูขุมขนของเจลควรมีการจัดการอย่างระมัดระวังเพื่อแยกโมเลกุลที่ดีออกจากการเจลอิเล็กโตรโฟเรซิส เจลไฟฟ้ามีสนามไฟฟ้าเชื่อมต่อกับปลายทั้งสองของเจล ปลายด้านหนึ่งของเจลจะแสดงประจุบวกในขณะที่ปลายอีกข้างหนึ่งจะถูกประจุลบ

DNA และ RNA เป็นโมเลกุลที่มีประจุลบ เมื่อใส่ลงในเจลจากปลายด้านลบของเจลและนำไปประยุกต์ใช้กับสนามไฟฟ้าพวกเขาจะโยกย้ายผ่านรูขุมขนเจลไปยังปลายที่มีประจุบวกของเจล ความเร็วของการย้ายถิ่นขึ้นอยู่กับค่าใช้จ่ายและขนาดของโมเลกุล โมเลกุลที่เล็กกว่าสามารถเคลื่อนย้ายได้ง่ายกว่ารูขุมขนเจลมากกว่าโมเลกุลที่ใหญ่กว่า ดังนั้นโมเลกุลที่มีขนาดเล็กเดินทางเป็นระยะทางไกลผ่านเจลและโมเลกุลที่มีขนาดใหญ่เดินทางในระยะทางสั้น ๆ เพื่อสังเกตการเดินทางของโมเลกุลบนเจลจะมีการใช้สีย้อมชนิดพิเศษ สนามไฟฟ้าใช้สำหรับช่วงเวลาหนึ่งและหยุดเพื่อป้องกันการสูญเสียโมเลกุลและเพื่อให้โมเลกุลที่ตำแหน่งเดินทางของพวกเขา สามารถสังเกตแถบสีต่างๆในเจลได้วงดนตรีเหล่านี้เป็นตัวแทนของโมเลกุลที่มีขนาดแตกต่างกัน ดังนั้นอิเลคโตรโฟเรซิสเจลจึงมีประโยชน์ในการแยกแยะโมเลกุลออกตามขนาด

การสังเคราะห์จีโนม ฯลฯ

รูปที่ 01: เจลอากาโรส (Agarose gel)

เจลอิเล็กโตรโฟเรสซิสถูกนำมารวมไว้ในเทคนิคต่าง ๆ เช่นเทคนิค PCR, RFLP, โคลน, ดีเอ็นเอลำดับ, electrophoresis

SDS Page คืออะไร?

โซเดียม dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis

(SDS Page) เป็นชนิดของเจลไฟฟ้าที่ใช้ในการแยกโปรตีน เมื่อมีการใช้อิเลคโตรโฟเรซิสเจลในการแยกโปรตีนการรักษาพิเศษจำเป็นเนื่องจากโปรตีนไม่ได้รับประจุลบเช่น DNA และ RNA และไม่เคลื่อนที่ไปทางปลายบวกหรือปลายด้านลบ ดังนั้นโปรตีนถูก denatured และเคลือบด้วยประจุลบก่อน gel electrophoresis ทำโดยใช้ผงซักฟอกชื่อว่า sodium dodecyl sulfate (SDS) electrophoresis เจลที่ใช้ SDS และ polyacrylamide gel สำหรับสื่อสนับสนุนเป็นที่รู้จักกันในชื่อ SDS Page เทคนิคนี้ใช้ในชีวเคมีพันธุศาสตร์นิติวิทยาศาสตร์และชีววิทยาระดับโมเลกุล ระหว่าง SDS Page โปรตีนจะถูกผสมกับ SDS SDS ช่วยให้โปรตีนมีรูปร่างเป็นเส้นตรงและเคลือบผิวด้วยประจุลบตามสัดส่วนของโมเลกุล เนื่องจากการประจุลบโมเลกุลโปรตีนจะโยกย้ายไปทางปลายประจุบวกของเจลและแยกตามมวลโมเลกุลของมัน ในหน้า SDS polyacrylamide ใช้เป็นตัวรองรับเจล การแยกโปรตีนส่วนใหญ่ขึ้นอยู่กับคุณสมบัติของเจล ดังนั้นการเตรียม polyacrylamide gel ควรทำอย่างรอบคอบและควรใช้ความเข้มข้นของ polyacrylamide ที่เหมาะสม เจล Polyacrylamide มีความละเอียดสูงกว่าเจล agarose ดังนั้น SDS Page ถือเป็นเทคนิคความละเอียดสูงสำหรับการแยกโปรตีน

SDS Page เป็นชนิดของเจลอิเล็กโตรโฟเรซิส มีข้อ จำกัด ที่สำคัญในการวิเคราะห์โปรตีน เนื่องจาก SDS เป็นตัวชี้วัดโปรตีนก่อนแยกออกจากกันทำให้ไม่สามารถตรวจจับการทำงานของเอนไซม์การมีปฏิสัมพันธ์ในโปรตีนโปรตีน cofactors ฯลฯ <รูปที่ 2: หน้า SDS

อะไรคือความแตกต่างระหว่าง Gel Electrophoresis และ SDS Page?

- บทความต่าง ๆ ก่อนกลางตาราง ->

เจลอิเลคโตรโฟเรซิสเทียบกับ SDS Page

เจลอิเล็กโตรโฟเรโซซิสคือวิธีการในการแยกโมเลกุลออกจากกันโดยใช้สนามไฟฟ้า

SDS Page คือเทคนิคการเจลไฟฟ้าสถิตความละเอียดสูงที่ใช้ในการแยกโปรตีนออกตามมวล

การวิ่งด้วยเจล สามารถทำได้ในแนวนอนหรือแนวตั้ง
หน้า SDS ทำงานในแนวตั้งเสมอ
พื้นฐานสำหรับการแยก การแยกจะเกิดขึ้นตามการประจุและขนาด
การแยกโปรตีนเกิดขึ้นตามมวลและค่าใช้จ่าย
ความละเอียด Agarose gel electrophoresis มีความละเอียดต่ำและ electrophoresis polyacrylamide gel มีความละเอียดสูงกว่า
SDS Page มีความละเอียดดีกว่า
Denaturation เจลอิเลคโตรโฟเรซิสประกอบด้วยเทคนิคการทำ denaturating และ non denaturing
SDS Page denatures โปรตีนก่อนที่จะแยก
ข้อมูลอย่างย่อ - Gel Electrophoresis vs SDS Page เจลอิเล็กโทรฟิเรสซิสเป็นเทคนิคทั่วไปที่ใช้ในการแยกและวิเคราะห์ DNA, RNA และโปรตีนตามขนาดและค่าใช้จ่าย มีสองประเภทหลักของเจล electrophoresis คือ agarose gel electrophoresis และ polyacrylamide gel electrophoresis Agarose gels ใช้เป็นหลักในการแยกกรดนิวคลีอิก; เมื่อต้องการความละเอียดสูงขึ้นจะใช้เจล polyacrylamide หน้า SDS เป็นประเภทของเจลไฟฟ้าที่ใช้กันโดยทั่วไปเพื่อแยกส่วนผสมที่ซับซ้อนของโปรตีน เป็นเทคนิคการแยกโปรตีนที่มีความละเอียดสูง นี่คือความแตกต่างระหว่าง gel electrophoresis และ SDS Page

การอ้างอิง:

1. Nowakowski, Andrew B., William J. Wobig และ David H. Petering SDS-PAGE แบบดั้งเดิม: การแยกโปรตีนด้วยความไวสูงด้วยการคงสมบัติของโลหะรวมถึงไอออนโลหะที่ยึด www NCBI NLM NIH gov N. p., พฤษภาคม 2014 เว็บ 7 เม.ย. 2017

2. Stellwagen, Nancy C. "อิเลคโตรโฟเรซิสของดีเอ็นเอในเจล agarose เจล polyacrylamide และในสารละลายฟรี Electrophoresis U. S. หอสมุดแห่งชาติแพทยศาสตร์, มิถุนายน 2009 Web 07 เม.ย. 2017

รูปภาพมารยphép:

1. "Gelelektrophoreseapparatur" (CC BY-SA 3. 0) โดยวิกิมีเดีย

2. "DNA Agarose gel electrophoresis" โดยโรงเรียนทรัพยากรธรรมชาติจาก Ann Arbor - ห้องดีเอ็นเอ (CC BY 2. 0) ผ่านวิกิพีเดีย