ความแตกต่างระหว่าง Gel Electrophoresis และ SDS Page | Gel Electrophoresis vs SDS Page
ความแตกต่างที่สำคัญ - เจล Electrophoresis vs SDS Page
เจลอิเลคโตรโฟเรซิสเป็นเทคนิคที่แยกโมเลกุลออกจากโมเลกุลในสนามไฟฟ้า เป็นวิธีการทั่วไปในชีววิทยาโมเลกุลเพื่อแยกดีเอ็นเออาร์เอ็นเอและโปรตีนออกจากสารผสมตามขนาดโมเลกุลของมัน หน้า SDS เป็นชนิดของเจลอิเล็กโทรเฟอร์เรซินที่ใช้ในการแยกโปรตีนออกจากส่วนผสมของโปรตีนตามขนาด เจลอิเล็กโตรโฟเรโซซิสเป็นคำศัพท์ที่ใช้เพื่ออ้างถึงเทคนิคปกติที่ใช้สำหรับ DNA, RNA และการแยกโปรตีน ในขณะที่ SDS Page คืออิเลคโตรโฟเรซิสเจลชนิดหนึ่ง นี่คือข้อแตกต่างที่สำคัญระหว่าง gel electrophoresis กับ SDS Page
เนื้อหา
1 ภาพรวมและข้อแตกต่างที่สำคัญ
2. Gel Electrophoresis คืออะไร
3. SDS Page คืออะไร
4. การเปรียบเทียบแบบ Side by Side - เจล Electrophoresis เทียบกับ SDS Page
5. สรุป
Gel Electrophoresis คืออะไร?
เจลไฟฟ้าเป็นเทคนิคทั่วไปที่ใช้ในห้องทดลองเพื่อแยกโมเลกุลที่มีประจุเช่น DNA, RNA, โปรตีน ฯลฯ จากส่วนผสมของพวกเขา เจลถูกใช้ในการเจลอิเล็กโตรโฟเรซิส มันทำหน้าที่เป็นตะแกรงโมเลกุล มีเจลสองชนิดที่ใช้ในการเจลอิเล็กโตรโฟเรซิสคือ agarose และ polyacrylamide การเลือกการเตรียมเจลและเจลเป็นปัจจัยสำคัญที่ต้องพิจารณาในเจล electrophoreses เนื่องจากขนาดรูขุมขนของเจลควรมีการจัดการอย่างระมัดระวังเพื่อแยกโมเลกุลที่ดีออกจากการเจลอิเล็กโตรโฟเรซิส เจลไฟฟ้ามีสนามไฟฟ้าเชื่อมต่อกับปลายทั้งสองของเจล ปลายด้านหนึ่งของเจลจะแสดงประจุบวกในขณะที่ปลายอีกข้างหนึ่งจะถูกประจุลบ
DNA และ RNA เป็นโมเลกุลที่มีประจุลบ เมื่อใส่ลงในเจลจากปลายด้านลบของเจลและนำไปประยุกต์ใช้กับสนามไฟฟ้าพวกเขาจะโยกย้ายผ่านรูขุมขนเจลไปยังปลายที่มีประจุบวกของเจล ความเร็วของการย้ายถิ่นขึ้นอยู่กับค่าใช้จ่ายและขนาดของโมเลกุล โมเลกุลที่เล็กกว่าสามารถเคลื่อนย้ายได้ง่ายกว่ารูขุมขนเจลมากกว่าโมเลกุลที่ใหญ่กว่า ดังนั้นโมเลกุลที่มีขนาดเล็กเดินทางเป็นระยะทางไกลผ่านเจลและโมเลกุลที่มีขนาดใหญ่เดินทางในระยะทางสั้น ๆ เพื่อสังเกตการเดินทางของโมเลกุลบนเจลจะมีการใช้สีย้อมชนิดพิเศษ สนามไฟฟ้าใช้สำหรับช่วงเวลาหนึ่งและหยุดเพื่อป้องกันการสูญเสียโมเลกุลและเพื่อให้โมเลกุลที่ตำแหน่งเดินทางของพวกเขา สามารถสังเกตแถบสีต่างๆในเจลได้วงดนตรีเหล่านี้เป็นตัวแทนของโมเลกุลที่มีขนาดแตกต่างกัน ดังนั้นอิเลคโตรโฟเรซิสเจลจึงมีประโยชน์ในการแยกแยะโมเลกุลออกตามขนาดการสังเคราะห์จีโนม ฯลฯ
รูปที่ 01: เจลอากาโรส (Agarose gel)เจลอิเล็กโตรโฟเรสซิสถูกนำมารวมไว้ในเทคนิคต่าง ๆ เช่นเทคนิค PCR, RFLP, โคลน, ดีเอ็นเอลำดับ, electrophoresis
SDS Page คืออะไร?
โซเดียม dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis
(SDS Page) เป็นชนิดของเจลไฟฟ้าที่ใช้ในการแยกโปรตีน เมื่อมีการใช้อิเลคโตรโฟเรซิสเจลในการแยกโปรตีนการรักษาพิเศษจำเป็นเนื่องจากโปรตีนไม่ได้รับประจุลบเช่น DNA และ RNA และไม่เคลื่อนที่ไปทางปลายบวกหรือปลายด้านลบ ดังนั้นโปรตีนถูก denatured และเคลือบด้วยประจุลบก่อน gel electrophoresis ทำโดยใช้ผงซักฟอกชื่อว่า sodium dodecyl sulfate (SDS) electrophoresis เจลที่ใช้ SDS และ polyacrylamide gel สำหรับสื่อสนับสนุนเป็นที่รู้จักกันในชื่อ SDS Page เทคนิคนี้ใช้ในชีวเคมีพันธุศาสตร์นิติวิทยาศาสตร์และชีววิทยาระดับโมเลกุล ระหว่าง SDS Page โปรตีนจะถูกผสมกับ SDS SDS ช่วยให้โปรตีนมีรูปร่างเป็นเส้นตรงและเคลือบผิวด้วยประจุลบตามสัดส่วนของโมเลกุล เนื่องจากการประจุลบโมเลกุลโปรตีนจะโยกย้ายไปทางปลายประจุบวกของเจลและแยกตามมวลโมเลกุลของมัน ในหน้า SDS polyacrylamide ใช้เป็นตัวรองรับเจล การแยกโปรตีนส่วนใหญ่ขึ้นอยู่กับคุณสมบัติของเจล ดังนั้นการเตรียม polyacrylamide gel ควรทำอย่างรอบคอบและควรใช้ความเข้มข้นของ polyacrylamide ที่เหมาะสม เจล Polyacrylamide มีความละเอียดสูงกว่าเจล agarose ดังนั้น SDS Page ถือเป็นเทคนิคความละเอียดสูงสำหรับการแยกโปรตีน
SDS Page เป็นชนิดของเจลอิเล็กโตรโฟเรซิส มีข้อ จำกัด ที่สำคัญในการวิเคราะห์โปรตีน เนื่องจาก SDS เป็นตัวชี้วัดโปรตีนก่อนแยกออกจากกันทำให้ไม่สามารถตรวจจับการทำงานของเอนไซม์การมีปฏิสัมพันธ์ในโปรตีนโปรตีน cofactors ฯลฯ <รูปที่ 2: หน้า SDS
อะไรคือความแตกต่างระหว่าง Gel Electrophoresis และ SDS Page?
- บทความต่าง ๆ ก่อนกลางตาราง ->
เจลอิเลคโตรโฟเรซิสเทียบกับ SDS Page
เจลอิเล็กโตรโฟเรโซซิสคือวิธีการในการแยกโมเลกุลออกจากกันโดยใช้สนามไฟฟ้า
SDS Page คือเทคนิคการเจลไฟฟ้าสถิตความละเอียดสูงที่ใช้ในการแยกโปรตีนออกตามมวล |
|
| การวิ่งด้วยเจล | สามารถทำได้ในแนวนอนหรือแนวตั้ง |
| หน้า SDS ทำงานในแนวตั้งเสมอ | |
| พื้นฐานสำหรับการแยก | การแยกจะเกิดขึ้นตามการประจุและขนาด |
| การแยกโปรตีนเกิดขึ้นตามมวลและค่าใช้จ่าย | |
| ความละเอียด | Agarose gel electrophoresis มีความละเอียดต่ำและ electrophoresis polyacrylamide gel มีความละเอียดสูงกว่า |
| SDS Page มีความละเอียดดีกว่า | |
| Denaturation | เจลอิเลคโตรโฟเรซิสประกอบด้วยเทคนิคการทำ denaturating และ non denaturing |
| SDS Page denatures โปรตีนก่อนที่จะแยก | |
| ข้อมูลอย่างย่อ - Gel Electrophoresis vs SDS Page | เจลอิเล็กโทรฟิเรสซิสเป็นเทคนิคทั่วไปที่ใช้ในการแยกและวิเคราะห์ DNA, RNA และโปรตีนตามขนาดและค่าใช้จ่าย มีสองประเภทหลักของเจล electrophoresis คือ agarose gel electrophoresis และ polyacrylamide gel electrophoresis Agarose gels ใช้เป็นหลักในการแยกกรดนิวคลีอิก; เมื่อต้องการความละเอียดสูงขึ้นจะใช้เจล polyacrylamide หน้า SDS เป็นประเภทของเจลไฟฟ้าที่ใช้กันโดยทั่วไปเพื่อแยกส่วนผสมที่ซับซ้อนของโปรตีน เป็นเทคนิคการแยกโปรตีนที่มีความละเอียดสูง นี่คือความแตกต่างระหว่าง gel electrophoresis และ SDS Page |
การอ้างอิง:
1. Nowakowski, Andrew B., William J. Wobig และ David H. Petering SDS-PAGE แบบดั้งเดิม: การแยกโปรตีนด้วยความไวสูงด้วยการคงสมบัติของโลหะรวมถึงไอออนโลหะที่ยึด www NCBI NLM NIH gov N. p., พฤษภาคม 2014 เว็บ 7 เม.ย. 2017
2. Stellwagen, Nancy C. "อิเลคโตรโฟเรซิสของดีเอ็นเอในเจล agarose เจล polyacrylamide และในสารละลายฟรี Electrophoresis U. S. หอสมุดแห่งชาติแพทยศาสตร์, มิถุนายน 2009 Web 07 เม.ย. 2017
รูปภาพมารยphép:
1. "Gelelektrophoreseapparatur" (CC BY-SA 3. 0) โดยวิกิมีเดีย
2. "DNA Agarose gel electrophoresis" โดยโรงเรียนทรัพยากรธรรมชาติจาก Ann Arbor - ห้องดีเอ็นเอ (CC BY 2. 0) ผ่านวิกิพีเดีย
