ความแตกต่างระหว่างการเพาะเลี้ยงในระดับประถมศึกษาและมัธยมศึกษา | การเพาะเลี้ยงทุติยภูมิกับเซลล์ทุติยภูมิ

ให้คำจำกัดความแรกเกี่ยวกับวัฒนธรรมของเซลล์ การเพาะเลี้ยงเซลล์เป็นกระบวนการของการขจัดเซลล์ออกจากสัตว์หรือพืชและการเจริญเติบโตตามมาในสภาพแวดล้อมที่ควบคุมโดยเทียม เซลล์สามารถถูกลบออกได้โดยตรงจากเนื้อเยื่อและแยกตามวิธีการของเอนไซม์หรือทางกลหรืออาจมาจากวัฒนธรรมที่ได้รับการจัดตั้งขึ้นแล้ว ความแตกต่างที่สำคัญระหว่างการเพาะเลี้ยงเซลล์หลักและทุติยภูมิคือเซลล์

สำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์หลักจะได้รับโดยตรงจากเนื้อเยื่อสัตว์หรือพืช ขณะที่เซลล์ สำหรับการเพาะเลี้ยงทุติยภูมิจะได้มาจากวัฒนธรรมหลักที่มีอยู่แล้ว ดังนั้นวัฒนธรรมรองเป็นวัฒนธรรมใหม่ที่มาจากวัฒนธรรมหลัก

ลองดูความหมายของวัฒนธรรมเซลล์หลักและรองเพื่อให้เห็นความแตกต่างได้ดียิ่งขึ้น

การเพาะเลี้ยงเซลล์หลักคืออะไร?

การเพาะเลี้ยงเซลล์ปฐมภูมิคือการแยกส่วนของเซลล์ออกจากเนื้อเยื่อพืชหรือเนื้อเยื่อพืชโดยวิธีเอนไซม์หรือทางกลและการเจริญเติบโตของเซลล์ในวัสดุที่เหมาะสมในภาชนะแก้วหรือพลาสติกภายใต้สภาวะแวดล้อมที่ควบคุมได้ เซลล์ในวัฒนธรรมหลักมี karyotype เดียวกัน (จำนวนและลักษณะของโครโมโซมในนิวเคลียสของเซลล์ยูคาริโอท) เป็นเซลล์เหล่านั้นในเนื้อเยื่อเดิม การเพาะเลี้ยงเซลล์ปฐมภูมิแบ่งได้เป็นสองประเภทตามชนิดของเซลล์ที่ใช้ในการเพาะเลี้ยง

เซลล์ยึดหรือยึดเกาะตาม Anchorage - เซลล์เหล่านี้ต้องการสิ่งที่แนบมาสำหรับการเจริญเติบโต เซลล์เนื้อเยื่อมักมาจากเนื้อเยื่อของอวัยวะเช่นจากไตที่เซลล์ถูกฝังอยู่และฝังอยู่ในเนื้อเยื่อเกี่ยวพัน

• Anchorage Independent หรือ Suspension Cells - เซลล์เหล่านี้ไม่ต้องการสิ่งที่แนบมาเพื่อการเจริญเติบโต กล่าวอีกนัยหนึ่งเซลล์เหล่านี้ไม่ติดกับพื้นผิวของเรือเพาะเลี้ยง วัฒนธรรมแขวนลอยทั้งหมดได้มาจากเซลล์ของระบบเลือด ตัวอย่างเช่นเซลล์เม็ดเลือดขาวเม็ดเลือดขาวถูกระงับในพลาสม่า

เซลล์ที่ได้จากวัฒนธรรมหลักมีช่วงชีวิตที่ จำกัด เซลล์ไม่สามารถจัดขึ้นได้เรื่อย ๆ เนื่องจากสาเหตุหลายประการ การเพิ่มจำนวนเซลล์ในวัฒนธรรมหลักจะทำให้ความเหนื่อยล้าของสารอาหารและสารอาหารนอกจากนี้กิจกรรมของเซลล์จะค่อยๆเพิ่มระดับของสารพิษที่เป็นพิษในวัฒนธรรมทำให้ยับยั้งการเจริญเติบโตของเซลล์ได้มากขึ้น

ในขั้นตอนนี้จะต้องมีการทำ Secondary หรือ Subculture เพื่อให้แน่ใจว่าเซลล์เติบโตอย่างต่อเนื่อง

การเพาะเลี้ยงเซลล์ที่สองคืออะไร?

ตามที่ได้อธิบายไว้ข้างต้นเมื่อเซลล์ในวัฒนธรรมที่ยึดติดอยู่กับพื้นผิวที่มีอยู่ทั้งหมดหรือเมื่อเซลล์ในวัฒนธรรมแขวนลอยเกินความสามารถของตัวกลางเพื่อรองรับการเจริญเติบโตต่อไปการแพร่กระจายของเซลล์จะเริ่มลดหรือหยุดลงอย่างสิ้นเชิง เพื่อที่จะรักษาความหนาแน่นของเซลล์ที่เหมาะสมสำหรับการเจริญเติบโตอย่างต่อเนื่องและเพื่อกระตุ้นการขยายตัวต่อไปวัฒนธรรมหลักจะต้องมีการเพาะเลี้ยง กระบวนการนี้เรียกว่าวัฒนธรรม

เซลล์ทุติยภูมิ ระหว่างการเพาะเลี้ยงเซลล์ทุติยภูมิเซลล์จากวัฒนธรรมหลักจะถูกถ่ายโอนไปยังเรือใหม่ที่มีอาหารสดใหม่ กระบวนการนี้เกี่ยวข้องกับการถอดสื่อการเจริญเติบโตก่อนหน้านี้และการแยกการยึดติดกับเซลล์ในหลักวัฒนธรรมที่ยึดมั่น การเพาะเลี้ยงเซลล์ทุติยภูมิเป็นระยะ ๆ เพื่อให้เซลล์มีพื้นที่เพิ่มขึ้นและมีสารอาหารที่สดใหม่ซึ่งจะช่วยยืดอายุเซลล์และขยายจำนวนเซลล์ในวัฒนธรรม

การเพาะเลี้ยงทุติยภูมิในระดับหนึ่งของวัฒนธรรมหลักให้อยู่ในปริมาณที่เท่ากันของการเจริญเติบโตที่สดใหม่จะช่วยให้การบำรุงรักษาเซลล์ในระยะยาว การเพาะเลี้ยงทุติยภูมิในอาหารที่มีขนาดใหญ่ขึ้นเพื่อเพิ่มจำนวนเซลล์ตัวอย่างเช่นในกระบวนการอุตสาหกรรมหรือการทดลองทางวิทยาศาสตร์

อะไรคือความแตกต่างระหว่างการเพาะเลี้ยงเซลล์หลักกับการเลี้ยงเซลล์ทุติยภูมิ?

ขณะนี้เราเข้าใจคำศัพท์ทั้งสองแบบแยกกันเราจะเปรียบเทียบทั้งสองเพื่อหาข้อแตกต่างอื่น ๆ

เมื่อใดควรใช้การเพาะเลี้ยงเซลล์หลักและ / หรือมัธยมศึกษา

ข้อมูลนี้ขึ้นอยู่กับสิ่งที่คุณต้องการเรียนรู้และคุณกำลังทดสอบประเภทใด

การเพาะเลี้ยงเซลล์ปฐมภูมิ:

นี่คือกระบวนการที่จะใช้ในการเพาะเลี้ยงเซลล์จากเนื้อเยื่อของพ่อแม่ที่มีความห่วงใย เซลล์ในวัฒนธรรมหลักจะมีอายุการใช้งานที่แน่นอนเนื่องจากความเหนื่อยล้าของสารตั้งต้นและสารอาหารและสร้างสารพิษขึ้นโดยการเติบโตของประชากร วัฒนธรรมหลักแม้จะมีเทคนิคการแยกที่ใช้ในกระบวนการแยกอาจมีเซลล์หลายประเภท อย่างไรก็ตามปัญหานี้อาจไม่ใช่ปัญหาในการทดลองทุกประเภทและในกรณีดังกล่าวสามารถใช้งานวัฒนธรรมหลักเพียงอย่างเดียวได้ การเพาะเลี้ยงทุติยภูมิ:

โดยปกติแล้วจำนวนเซลล์ที่ได้จากการเพาะเลี้ยงหลักไม่เพียงพอในการทดลอง การเพาะเลี้ยงเซลล์ทุติยภูมิช่วยให้มีโอกาสในการขยายเซลล์และยืดอายุขัย ช่วยให้สามารถเลือกเซลล์เพิ่มเติมโดยใช้สื่อที่มีการคัดเลือกและช่วยให้ความเหมือนกันของ genotypic และ phenotypic ในประชากร กระบวนการนี้ใช้เพื่อสร้างวัฒนธรรมที่ซ้ำกันสำหรับการกำหนดลักษณะการเก็บรักษาและการทดลองขั้นพื้นฐาน ความคล้ายคลึงกับเนื้อเยื่อของผู้ปกครอง

การเพาะเลี้ยงเซลล์หลัก:

เซลล์สำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์ปฐมภูมิจะได้รับโดยตรงจากเนื้อเยื่อของสัตว์หรือพืช ดังนั้นเซลล์ในวัฒนธรรมหลักคล้ายคลึงกับเนื้อเยื่อของผู้ปกครองดังนั้นการตอบสนองทางชีวภาพอาจใกล้เคียงกับสถานการณ์ในร่างกายมากกว่าเซลล์ที่สอง การเพาะเลี้ยงเซลล์ที่สอง:

วัฒนธรรมของเซลล์ทุติยภูมิเกิดจากการเพาะเลี้ยงเซลล์หลัก แม้ว่าการเพาะเลี้ยงตัวอ่อนจะยืดอายุการใช้งานของเซลล์ แต่มีความเป็นไปได้ที่ว่าหลังจากไม่กี่ขั้นตอนเซลล์อาจถูกเปลี่ยนหรืออาจสูญเสียการควบคุมไม่ให้แบ่งมากกว่าจำนวนครั้งที่กำหนด ซึ่งอาจเป็นเพราะการกลายพันธุ์หรือการเปลี่ยนแปลงทางพันธุกรรมในเซลล์หลักระหว่างการเพาะเลี้ยงตัวอ่อน ตัวอย่างเช่นจุลินทรีย์บางชนิดมีแนวโน้มที่จะปรับตัวให้เข้ากับสภาวะการเพาะเลี้ยงซึ่งส่วนใหญ่ต่างจากสภาพแวดล้อมทางธรรมชาติโดยการเปลี่ยนแปลงชีววิทยาของมัน การเพาะเลี้ยงเซลล์หลัก:

ในการเพาะเลี้ยงเซลล์หลักเนื้อเยื่อของสัตว์หรือพืชจะผ่านขั้นตอนการล้างน้ำการผ่าและการแยกย่อยทางกลหรือเอนไซม์ เนื้อเยื่อที่ไม่รวมกันจะมีความหลากหลายของชนิดของเซลล์ที่แตกต่างกันซึ่งอาจจำเป็นต้องใช้เทคนิคการแยกเพื่อแยกเซลล์ที่น่าสนใจ

การเพาะเลี้ยงเซลล์ที่สอง: ในการเลี้ยงเซลล์ทุติยภูมิถ้าวัฒนธรรมหลักเป็นวัฒนธรรมยึดมั่นขั้นตอนแรกคือการถอดเซลล์ออกจากสิ่งที่แนบมา (พื้นผิวของเรือเพาะเลี้ยง) ด้วยวิธีทางกลหรือเอ็นไซม์ จากนั้นเซลล์จะต้องถูกแยกออกจากกันเพื่อสร้างการระงับเซลล์เดี่ยว

จำนวนเซลล์ในวัฒนธรรม การเพาะเลี้ยงเซลล์หลัก:

ไม่ควรให้มีการระงับเซลล์เดี่ยวที่สมบูรณ์แบบเนื่องจากเซลล์หลักจำนวนมากสามารถอยู่รอดได้ดีในกลุ่มเล็ก ๆ

การเพาะเลี้ยงเซลล์ที่สอง: เพียงพอที่จะทำให้เกิดการระงับเซลล์เดี่ยว

อายุการเจริญเติบโต การเพาะเลี้ยงเซลล์หลัก:

การเพาะเลี้ยงเซลล์ปฐมภูมิมีช่วงชีวิตที่ จำกัด ตามที่อธิบายไว้ข้างต้นนี้เป็นเพราะการเจริญเติบโตของเซลล์ exhausts พื้นผิวและสารอาหารและนำไปสู่การสะสมของสารพิษ เป็นผลให้ค่อยๆอัตราการเติบโตของเซลล์ลดลงนำไปสู่การตายของเซลล์

การเพาะเลี้ยงเซลล์ที่สอง: การเพาะเลี้ยงเซลล์ทุติยภูมิช่วยเพิ่มอายุการใช้งานของเซลล์ การเพาะเลี้ยงเป็นระยะ ๆ อาจทำให้เซลล์อมตะผ่านการเปลี่ยนแปลงหรือการเปลี่ยนแปลงทางพันธุกรรมของเซลล์ปฐมภูมิ

ความเสี่ยงต่อการปนเปื้อน การเพาะเลี้ยงเซลล์หลัก:

การเพาะเลี้ยงเซลล์ปฐมภูมิเป็นเรื่องยากที่จะดูแล โดยทั่วไปการเพาะเลี้ยงเซลล์ต้นกำเนิดต้องมีส่วนผสมของกรดอะมิโนจุลธาตุอาหารฮอร์โมนและปัจจัยการเจริญเติบโตที่หลากหลาย ผลที่ตามมาความเสี่ยงต่อการปนเปื้อนของเชื้อในเซลล์ปฐมภูมิสูงกว่าการเพาะเลี้ยงเซลล์ทุติยภูมิ

การเลี้ยงเซลล์ทุติยภูมิ: การเลี้ยงเซลล์ทุติยภูมิมีความง่ายในการรักษาและความเสี่ยงต่อการปนเปื้อนต่ำกว่าการเพาะเลี้ยงเซลล์ต้นกำเนิด

ในบทความนี้เราได้พยายามทำความเข้าใจเงื่อนไขการเพาะเลี้ยงเซลล์หลักและการเพาะเลี้ยงเซลล์ทุติยภูมิตามด้วยการเปรียบเทียบเพื่อเน้นความแตกต่างที่สำคัญระหว่างพวกเขา ความแตกต่างพื้นฐานอยู่ในวิธีการที่เซลล์มาจากวัฒนธรรม เซลล์สำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์หลักจะได้รับโดยตรงจากเนื้อเยื่อสัตว์หรือพืชในขณะที่เซลล์สำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์ทุติยภูมิจะได้มาจากวัฒนธรรมหลักที่มีอยู่แล้ว เอกสารอ้างอิง:

ข้อมูลพื้นฐานเกี่ยวกับการเพาะเลี้ยงเซลล์ - คู่มือโดย Invitrogen และ Gibco Freshney, R.I. (2006) หลักการพื้นฐานของการเพาะเลี้ยงเซลล์

ศูนย์เนื้องอกวิทยาและเภสัชวิทยาประยุกต์ รูปภาพมารยาท: "Cell Culture" โดย Umberto Salvagnin (CC BY 2. 0) ผ่าน Flickr