ความแตกต่างระหว่าง PBS ของ Dulbecco และ PBS ความแตกต่างระหว่าง

Anonim

DPBS vs PBS

PBS หรือน้ำเกลือที่มีบัฟเฟอร์ฟอสเฟตและน้ำเกลือฟอสเฟตบัฟเฟอร์ของ Dulbecco (DPBS) เป็นน้ำเกลือที่อุดมด้วยบัฟเฟอร์ที่ใช้ในการศึกษาทางชีววิทยา PBS และ DPBS ใช้ในการวิจัยเกี่ยวกับเซลล์ ความเข้มข้นไอออนของไอออนและความเข้มข้นของออสโมลาซิสคือไอโซโทโทเนตินั่นคือเข้ากันได้กับร่างกายมนุษย์ บัฟเฟอร์อำนวยความสะดวกในการจัดหาและรักษาความเป็นกรด - ด่างที่มีค่าคงที่เท่ากับ 7. 2-7 6.

ไม่มีความแตกต่างระหว่าง PBS และ DPBS ทั้งสองมีโซเดียมฟอสเฟตโซเดียมคลอไรด์และเมื่อจำเป็นโพแทสเซียมฟอสเฟตและโพแทสเซียมคลอไรด์ การเตรียมการอื่น ๆ เช่น DPBS อาจมีหรือไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม PBS และ DPBS มีแอ็พพลิเคชันมากมายเนื่องจากไม่เป็นอันตรายต่อเซลล์ ทั้งพีบีเอสและ DPBS สามารถใช้ล้างภาชนะหรือภาชนะที่ปนเปื้อนด้วยเซลล์ นอกจากนี้ทั้งสองสามารถใช้ในสารเจือจาง โมเลกุลของน้ำภายในตัวเจือปนเช่นโปรตีนจะถูกระงับและแห้ง น้ำที่ผสมผสานกับสารช่วยให้สารไม่อยู่ภายใต้การปรับเปลี่ยนรูปร่างเช่นการสึกหรอ แคลเซียมและแมกนีเซียมอาจยับยั้งการทำงานของ trypsin ได้ ในการวัดค่าพาสโบปนี้การดูดซับโปรตีนสามารถวัดได้โดยอาศัยสเปกตรัมพื้นฐานโดยใช้ PBS

น้ำเกลือฟอสเฟตบัฟเฟอร์พร้อมสารเติมแต่งเช่น EDTA สามารถใช้แยกเซลล์ที่รวมกันได้ ฝนจะเกิดขึ้นเมื่อสังกะสีซึ่งเป็นโลหะ divalent จะถูกเพิ่มเข้าไปใน PBS ซึ่งเป็นสาเหตุที่ทำให้ไม่สามารถเพิ่มเซลล์ที่ไม่ได้ปลดออกได้ บัฟเฟอร์ของ Good ถูกใช้แทนสังกะสีในสถานการณ์เช่นนี้

น้ำเกลือบัฟเฟอร์ฟอสเฟตและน้ำเกลือฟอสเฟตของ Dulbecco มีการเตรียมไว้หลายวิธี วิธีหนึ่งที่จะเตรียมมันคือการละลาย 800 กรัม โซเดียมคลอไรด์, 20 กรัม โพแทสเซียมคลอไรด์ 2 โมเลกุลน้ำ 24 กรัม โพแทสเซียมฟอสเฟตและ 144 กรัม โซเดียมฟอสเฟตในน้ำกลั่น 8 ลิตร ผลลัพธ์ก็คือ 10 ลิตรของ PBS 10 เท่า วัดความเป็นกรด - ด่างของ PBS โดยตรงโดยใช้เครื่องวัดค่า pH เมื่อเตรียมสารละลายบัฟเฟอร์ pH ของสารละลายสามารถปรับได้โดยใช้โซเดียมไฮดรอกไซด์หรือกรดไฮโดรคลอริก เกลือฟอสเฟตบัฟเฟอร์เป็นตัวทำละลายเตรียมด้วยความเข้มข้นของฟอสเฟต 10 mM, 137 mM โซเดียมคลอไรด์, 2 7 mM โพแทสเซียมคลอไรด์และ pH 7. 4. Fritsch, Sambrook และ Maniatis มีวิธีการในการเตรียมบัฟเฟอร์ การแก้ปัญหาในหนังสือของพวกเขาที่ชื่อ "โคลนโมเลกุล. "ดังนั้นสำหรับลิตรของ PBS 1x เริ่มเตรียมด้วย 800 มล. ของน้ำที่กลั่น รวม 8 กรัม ของโซเดียมคลอไรด์และ 2 กรัม ของโพแทสเซียมคลอไรด์ 1. 44 g ของโซเดียมฟอสเฟตตามด้วย 0. 24 กรัม โพแทสเซียมฟอสเฟต ใส่กรดไฮโดรคลอริกเพื่อปรับค่าความเป็นกรดด่างให้เป็น 7 4. เมื่อต้องการเพิ่ม PBS ปริมาตร 1 ลิตรให้เพิ่มน้ำกลั่นมากขึ้นจนกว่าจะปรับระดับได้ถึง 1 ลิตรนำสารละลายที่ได้นำมาผสมเป็นชิ้นส่วนและใช้หม้อนึ่งฆ่าเชื้อเพื่อทำหมันสารละลาย ปรับหม้อหุงต้มให้เป็นอุณหภูมิ 121 องศาเซลเซียสและนำไปต้มนึ่งให้เป็นกลางภายในเวลา 20 นาที หลังจากนั้นเก็บสารละลายที่อุณหภูมิห้อง

แม้ว่าน้ำคลอรีนที่มีฟอสฟอรัสและน้ำเกลือฟอสเฟตของ Dulbecco ถูกเตรียมไว้หลายวิธี แต่เนื้อหายังคงเหมือนเดิม ดังนั้นไม่ว่าจะเป็นการจัดเตรียมผลลัพธ์และการใช้งานยังคงเหมือนเดิม

สรุป:

1. PBS หรือน้ำเกลือบัฟเฟอร์ฟอสเฟตและน้ำเกลือฟอสเฟตของ Dulbecco (DPBS) เป็นบัฟเฟอร์ที่ใช้ในการศึกษาทางน้ำเค็ม

2 ความเข้มข้นไอออนของไอออนและความเข้มข้นของออสโมลาซิสคือไอโซโทโทเนตินั่นคือเข้ากันได้กับร่างกายมนุษย์ บัฟเฟอร์อำนวยความสะดวกในการจัดหาและรักษาความเป็นกรด - ด่างที่มีค่าคงที่เท่ากับ 7. 2-7 6. 999 3. ไม่มีความแตกต่างระหว่าง PBS และ DPBS ทั้งสองมีโซเดียมฟอสเฟตโซเดียมคลอไรด์และเมื่อจำเป็นโพแทสเซียมฟอสเฟตและโพแทสเซียมคลอไรด์ การเตรียมการอื่น ๆ เช่น DPBS อาจมีหรือไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม

4 ทั้งพีบีเอสและ DPBS สามารถใช้ล้างภาชนะหรือภาชนะที่ปนเปื้อนด้วยเซลล์ นอกจากนี้ทั้งสองสามารถใช้ในสารเจือจาง โมเลกุลของน้ำภายในตัวเจือปนเช่นโปรตีนจะถูกระงับและแห้ง น้ำที่ผสมผสานกับสารช่วยให้สารไม่อยู่ภายใต้การปรับเปลี่ยนรูปร่างเช่นการสึกหรอ แคลเซียมและแมกนีเซียมอาจยับยั้งการทำงานของ trypsin ได้ ในการวัดค่าพาสโบปนี้การดูดซับโปรตีนสามารถวัดได้โดยอาศัยสเปกตรัมพื้นฐานโดยใช้ PBS

5 น้ำเกลือที่มีบัฟเฟอร์ฟอสเฟตพร้อมสารเติมแต่งเช่น EDTA สามารถใช้แยกเซลล์ที่รวมกันได้ ฝนจะเกิดขึ้นเมื่อสังกะสีซึ่งเป็นโลหะ divalent จะถูกเพิ่มเข้าไปใน PBS ซึ่งเป็นสาเหตุที่ทำให้ไม่สามารถเพิ่มเซลล์ที่ไม่ได้ปลดออกได้ บัฟเฟอร์ของ Good ถูกใช้แทนสังกะสีในสถานการณ์เช่นนี้

6 PBS และ DPBS จัดทำขึ้นหลายวิธี ถึงแม้จะมีน้ำเกลือฟอสเฟตบัฟเฟอร์และน้ำเกลือฟอสเฟตของ Dulbecco เตรียมไว้หลายวิธี แต่เนื้อหายังคงเหมือนเดิม ดังนั้นไม่ว่าจะเป็นการจัดเตรียมผลลัพธ์และการใช้งานยังคงเหมือนเดิม