ความแตกต่างระหว่าง Selectable Marker กับ Reporter Gene | Selectable Marker vs Reporter Gene

Anonim

ความแตกต่างที่สำคัญ - เลือกเครื่องหมายเทียบกับยีนรายงาน

เทคนิคทางพันธุวิศวกรรมใช้ในการถ่ายโอนยีนที่สำคัญจากสิ่งมีชีวิตไปสู่สิ่งมีชีวิตอื่น การแทรกยีนต่างชาติลงไปในจีโนมของอวัยวะอื่นและทำให้มันแสดงออกภายในเซลล์เจ้าเป็นขั้นตอนที่ยากที่สุดในการถ่ายทอดยีน เพื่อตรวจสอบความสำเร็จของกระบวนการแปลงสัญญาณเครื่องหมายเลือกและยีนนักข่าวจะถูกใช้ในโมเลกุล recombinant เครื่องหมายเลือกได้คือลำดับดีเอ็นเอหรือยีนที่แสดงออกและเลือกเซลล์ที่เปลี่ยนจากเซลล์ที่ไม่ได้เปลี่ยนไป ยีนของนักข่าวเป็นอีกหนึ่งยีนที่ใช้ในการแยกแยะความแตกต่างของเซลล์ที่เปลี่ยนไปและหาปริมาณหรือตรวจจับการทำงานของยีนที่แทรกเข้าไปภายในโฮสต์ ความแตกต่างที่สำคัญระหว่างเครื่องหมายที่เลือกได้กับยีนของนักข่าวคือเครื่องหมายเลือกใช้สำหรับการตรวจสอบเซลล์ที่ไม่เปลี่ยนรูปและการส่งสัญญาณไปยังเซลล์ที่เปลี่ยนไปในขณะที่ยีนของนักข่าวใช้เพื่อหาจำนวนยีนที่แสดงออกภายในโฮสต์

เนื้อหา

1 ภาพรวมและข้อแตกต่างที่สำคัญ

2. Marker เลือกได้คืออะไร

3. ยีนรายงานคืออะไร

4. การเปรียบเทียบแบบเคียงข้างกัน - เลือก Marker vs Reporter Gene

5. สรุป

เครื่องหมายที่สามารถเลือกได้คืออะไร?

ในด้านพันธุวิศวกรรมยีนที่น่าสนใจจะถูกแทรกเข้าไปในเวกเตอร์ที่เหมาะสมและเปลี่ยนเป็นสิ่งมีชีวิตที่เป็นเจ้าภาพ อย่างไรก็ตามการเปลี่ยนแปลงจะประสบความสำเร็จเฉพาะในเซลล์เจ้าบ้านที่มีอำนาจและมีความเป็นไปได้ที่เซลล์เจ้าบ้านจะปฏิเสธการดูดซึมของดีเอ็นเอต่างประเทศ ดังนั้นความแตกต่างของเซลล์ที่ได้รับการแปลงและไม่เปลี่ยนตัวจึงมีความสำคัญต่อการทดลองต่อไป ดังนั้นนักวิจัยจึงนำยีนเครื่องหมายที่เลือกไปใช้กับเวกเตอร์เพื่อเลือกเซลล์ที่เปลี่ยนไปจากเซลล์ที่ไม่ได้เปลี่ยนรูปได้ง่าย เครื่องหมายที่เลือกได้คือลำดับดีเอ็นเอโดยเฉพาะอย่างยิ่งยีนที่มีประโยชน์ในการระบุเซลล์ที่เปลี่ยนไป ยีนเครื่องหมายนี้มีลักษณะที่เหมาะสมกับการเลือกเทียมของเซลล์ที่เปลี่ยนจากเซลล์ที่ไม่เปลี่ยนไปเป็นสื่อ

เครื่องหมายที่สามารถเลือกได้มากที่สุดในอณูชีววิทยาระดับโมเลกุลคือยีนที่ทนต่อยาปฏิชีวนะ ยีนต่อต้านความต้านทานยาปฏิชีวนะถูกแทรกเข้าไปในเวกเตอร์และเปลี่ยนเป็นเซลล์เจ้าภาพโดยเฉพาะแบคทีเรียที่เป็นเจ้าภาพ ยาปฏิชีวนะชนิดนี้ถูกรวมเข้าไปในอาหารที่กำลังเติบโตของแบคทีเรีย เนื่องจากมีเครื่องหมายเลือกอยู่ภายใต้สภาวะที่เลือกเฉพาะเซลล์ที่มีเครื่องหมายเลือกที่เหมาะสมเท่านั้นที่สามารถอยู่รอดได้เซลล์ที่ไม่เปลี่ยนรูปจะไม่สามารถเจริญเติบโตได้ในตัวกลางที่มีปฏิชีวนะ ดังนั้นเนื่องจากเครื่องหมายที่เลือกได้ซึ่งสามารถทนต่อยาปฏิชีวนะจึงสามารถระบุเซลล์ที่เปลี่ยนไปได้อย่างง่ายดาย

ยีนที่มีลักษณะพิเศษสำหรับ antimetabolites สารเคมีกำจัดวัชพืชถูกใช้เป็นตัวบ่งชี้การคัดเลือกในการโคลนพาหะในพืชพันธุวิศวกรรม อย่างไรก็ตามการเปลี่ยนแปลงของตัวบ่งชี้ที่เลือกลงในสิ่งมีชีวิตดัดแปลงพันธุกรรมมีผลเสียต่อสิ่งแวดล้อมและมนุษย์ การปล่อยแบคทีเรียทนยาปฏิชีวนะสามารถเพิ่มความต้านทานต่อยาปฏิชีวนะของเชื้อโรคของมนุษย์ สามารถปนเปื้อนผลิตภัณฑ์หรือสิ่งมีชีวิตต่อสิ่งมีชีวิตโดยใช้ยาปฏิชีวนะและสามารถสูญเสียความดันที่เลือกได้อันเป็นผลมาจากการย่อยสลายและการใช้สารปฏิชีวนะ

รูปที่ 01: เวกเตอร์พลาสมิดสำหรับการถ่ายโอนยีนด้วยเครื่องหมายเลือกได้

ยีนรายงานคืออะไร?

ยีนผู้สื่อข่าวเป็นยีนที่สามารถตรวจจับหรือวัดการแสดงออกของยีนที่แทรกไว้ได้ ยีนผู้สื่อข่าวเหล่านี้สามารถเชื่อมโยงกับลำดับกฎระเบียบของยีนที่น่าสนใจเพื่อส่งสัญญาณตำแหน่งหรือระดับการแสดงออก ดังนั้นในระหว่างการแสดงออกของยีนภายใต้โปรโมเตอร์เดียวกันจะถูกแปลเป็นลำดับ mRNA เดี่ยวและแปลเป็นโปรตีนซึ่งสามารถบ่งบอกถึงระดับของการแสดงออกของยีน

ยีนผู้สื่อข่าวมีหลายประเภทและมีลักษณะที่สามารถระบุตัวตนได้ซึ่งมักเกี่ยวข้องกับโปรตีนเรืองแสงและเรืองแสง ยีนที่เข้ารหัสโปรตีนเรืองแสงและเอนไซม์แปลงพื้นผิวที่มองไม่เห็นให้เป็นผลิตภัณฑ์เรืองแสงหรือสีโดยการส่งสัญญาณการแสดงออกของยีนที่ประสบความสำเร็จและให้โอกาสในการหาจำนวนของการแสดงออกของยีน

รูปที่ 02: Repress Gene Expression

ความแตกต่างระหว่าง Selectable Marker กับ Reporter Gene คืออะไร?

- บทความอื่น ๆ Middle before Table ->

Marker เลือกและยีนผู้สื่อข่าว

เครื่องหมายที่เลือกได้คือลำดับดีเอ็นเอที่ช่วยแยกแยะความแตกต่างระหว่างเซลล์ที่เปลี่ยนไปกับเซลล์ที่ไม่ได้เปลี่ยนไป

ยีน Reporter เป็นยีนที่ช่วยในการหาจำนวนยีนของยีนที่ต้องการที่แทรกเข้าไปในเซลล์เจ้าบ้าน

ลักษณะของยูนิตที่ผลิต

ยีนมีการเข้ารหัสที่มีลักษณะเฉพาะที่ช่วยในการเลือกประดิษฐ์บนสื่อปลูก ยีนถูกเข้ารหัสด้วยลักษณะที่มองเห็นได้
การใช้งาน
ยีนแอนติบอดีต่อยีนยีน antimetabolite ยีนต้านทานสารเคมีกำจัดวัชพืช ฯลฯ เป็นตัวอย่างสำหรับเครื่องหมายที่เลือกได้ เป็นรหัสยีนสำหรับโปรตีนเรืองแสงสีเขียวβ-glucuronidase, Chloramphenicol acetyltransferase โปรตีนเรืองแสงสีแดง ฯลฯ เป็นตัวอย่าง
บทคัดย่อ - Selectable Marker vs Reporter Gene
Markers ที่สามารถเลือกได้จะช่วยให้เซลล์ที่มีการเปลี่ยนแปลงสามารถเติบโตในอาหารที่ได้รับการคัดเลือกโดยมียาปฏิชีวนะหรือสารกำจัดวัชพืชบางชนิด พวกเขาจะใช้สำหรับการเลือกช่วงต้นของเซลล์ที่เปลี่ยนไป ยีนผู้สื่อข่าวใช้เพื่อหาจำนวนระดับการแสดงออกของยีนที่ต้องการ พวกเขายังช่วยให้ความแตกต่างของเซลล์ที่แปลงและไม่เปลี่ยน นี่คือความแตกต่างระหว่าง marker markable และ gene reporterทั้งเครื่องหมายเลือกและยีนของนักข่าวถือเป็นเครื่องหมายสำคัญในสาขาพันธุวิศวกรรม การอ้างอิง:

1. Ziemienowicz, Alicja "พืชเลือก markers และยีน reporter. “SpringerLink Springer-Verlag, n. d เว็บ. 23 มี.ค. 2017.

2. Shih, Chen-Han, Hsiao-Yin Chen, Hung-Chieh Lee และ Huai-Jen Tsai ยีนยีนสีม่วงทำหน้าที่เป็นตัวเลือกใหม่สำหรับการเปลี่ยนถ่ายเชื้อ Microalga Nannochloropsis oculata "PLOS ONE ห้องสมุดสาธารณะวิทยาศาสตร์ n d เว็บ. 25 มี.ค. 2017

ภาพมารยphép:

1. "Plasmid with insert" โดย Michael Jeltsch - งานของตัวเอง (CC BY-SA 4. 0) ผ่านทาง Commons Commons: Commons: 2. "Reporter gen" โดย TransControl at en. วิกิพีเดีย (CC BY-SA 3. 0) via Commons Wikimedia