การแปลงและการถ่ายเลือด | ความแตกต่างระหว่างการแปลงและการถ่ายเลือด

การเปลี่ยนแปลงของเซลล์การถ่ายโอนเซลล์การถ่ายโอนและ transfection ความแตกต่างระหว่างการแปลงและ transfection > การแปลงและการถ่ายเลือด

การแปลงและการถ่ายยีนเป็นสองเทคนิคง่ายๆที่ใช้เพื่อนำยีนต่างชาติเข้าสู่เซลล์ต้นกำเนิด อย่างไรก็ตามเทคนิคเหล่านี้ขึ้นอยู่กับชนิดของระบบโฮสต์หรือเวกเตอร์

การแปลงเซลล์คืออะไร?

การแปลงเป็นเทคนิคที่ใช้ในการแนะนำยีนในยีสต์และเซลล์แบคทีเรีย เทคนิคนี้มักจะทำให้เกิดการเปลี่ยนแปลงทางพันธุกรรมในยีนและทำให้การแสดงออกของยีนเป็นไปอย่างถาวร การเปลี่ยนแปลงของแบคทีเรียเป็นครั้งแรกในปีพ. ศ. 2471 โดย Frederick Griffith จากนั้นในช่วงต้นทศวรรษ 1970 เทคนิคนี้ใช้ใน

E coli ระหว่างกระบวนการแปรรูป E coli เซลล์ถูกแช่ในสารละลายที่มีน้ำแข็งเย็นของ CaCl 2 _{ขั้นตอนนี้ทำให้} E coli เซลล์ที่มีความสามารถ หลังจากนั้นเซลล์ที่มีความสามารถผสมกับดีเอ็นเอ plasmid และถูกบ่มในน้ำแข็งเป็นเวลา 20-30 นาที จากนั้นจะมีการให้ความร้อนในระยะสั้นเพื่อให้สามารถถ่ายโอนดีเอ็นเอไปยังเซลล์ได้ สุดท้ายเซลล์จะอยู่ในน้ำซุปข้นและนำไปบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 60-90 นาทีเพื่อสร้าง plasmids เมื่อขั้นตอนเหล่านี้เสร็จสมบูรณ์เซลล์ที่เปลี่ยนไปสามารถวางลงบนสื่อที่เหมาะสมสำหรับการขยายพันธุ์ของเซลล์ เนื่องจากการเปลี่ยนแปลงถือเป็นเทคนิคที่ไม่มีประสิทธิภาพจึงอาจไม่สามารถนำมาใช้ในการจัดทำธนาคารโคลนนิ่งได้

Transfection เซลล์คืออะไร?

การถ่ายเลือดเป็นวิธีการแนะนำยีนต่างชาติโดยปกติเข้าไปในเซลล์ของสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม มีสองวิธีในการถ่ายเลือด คือ transfection ชั่วคราวและ transfection มั่นคง ในการถ่ายภาพชั่วคราวการแสดงออกของยีนสามารถใช้ได้ในระยะเวลาที่ จำกัด ดังนั้นการเปลี่ยนแปลงของยีนทำให้เกิดการแสดงออกชั่วคราว วิธีการถ่ายเลือดนี้ทำได้ง่ายและรวดเร็ว จึงสามารถใช้งานได้เป็นประจำ ข้อเสียเปรียบของ transfection ชั่วคราวคือความยากในการใช้ระบบสังเคราะห์โปรตีนขนาดใหญ่

ในระหว่างการถ่ายยีนที่มีเสถียรภาพยีนเป้าหมายจะถูกรวมเข้ากับจีโนมของเซลล์เจ้าบ้านและการแสดงออกของยีนจะเป็นแบบถาวรซึ่งแตกต่างจาก transfection ชั่วคราว

อะไรคือความแตกต่างระหว่าง Transformation กับ Transfection?

•การแปลงเป็นการนำยีนเข้าสู่เซลล์โปรคาริโอต (แบคทีเรียและยีสต์) ในขณะที่ transfection มักเรียกว่าการแนะนำยีนเข้าไปในเซลล์เลี้ยงลูกด้วยนม

ผลการแปลงทำให้เกิดการเปลี่ยนแปลงทางพันธุกรรมในยีนในขณะที่การถ่ายเลือดอาจส่งผลให้มีการแสดงออกชั่วคราวหรือการเปลี่ยนแปลงยีนอย่างถาวร